Witam grupowiczow!
Czy slusznym jest postepowanie, majace na celu uzyskanie zmodyfikowanej
swinskiej insuliny, w czasie ktorego dokonuje sie:
1) izolacji mRNA swinskiej insuliny
2) amplifikacji w reakcji RT-PCR osobno lancuchow A i B insuliny, z
pominieciem peptydu laczacego C, z jednoczensym wprowadzeniem punktowej
mutacji w pozycji 30 lancucha B, polegajacej na zamanie kodonu GCC na ACC,
ktory jest specyficzny dla insuliny ludzkiej
3) przeprowadzenie translacji in vitro
4) formowanie bialka - mam na mysli formowanie mostkow dwusiarczkowych.
Czy uzyskana w ten sposob insulina, uformuje we wlasciwy sposob disulfidowe
mostki i zachowa swoja aktywnosc?
W jaki sposob "zmusic" insuline aby przyjela wlasciwa konformacje i
wytworzyla mostki S-S we wlasicwych miejscach?
Jesli ktos prowadzil podobne badania, bardzo prosze o e-maila na adres:
h...@w...pl
Dziekuje i pozdrawiam.
Helisa